真性红细胞增多症患者白细胞计数升高与血栓事件之间的关联

入组时，回顾性收集入组前6个月期间包括PV诊断持续时间在内的数据。从患者病历中获取人口统计学、疾病诊断和病程以及病史和家族史的数据，并输入电子研究表格；入组后，在随访期间（自最后一次患者入组后最多3年）收集前瞻性数据。收集的前瞻性数据包括从入组到患者停止研究、死亡或研究结束的病程、放血程序、实验室结果和药物。TE根据医生文件进行分类。在记录不明确的情况下，使用事件的自由文本描述来表征TE类型。

使用静态变量和时间相关变量的协变量Cox比例风险模型评估血细胞计数与TE发生之间的关联。对于没有TE的患者，研究期间首次TE的时间在最后一次已知就诊时截尾的随访时间进行了建模;个体患者的第一次入组TE之后发生的其他TE被排除在时间依赖性协变量和生存分析之外。实验室值、羟基脲（HU）治疗和其他PV定向治疗被纳入整个研究期间变化的时间依赖性协变量。使用时间依赖性协变量可以评估实验室值升高和/或特定治疗的变化是否与TE发生相关。在特定时间点记录的治疗（胡或其他PV定向治疗）数据将被保留，直到在随后的时间点记录新的实验室值，或者如果患者停药或有TE。与入组时测量的静态基线协变量（年龄、性别、疾病持续时间和TE病史）和时间依赖性治疗协变量一起独立建模。线性插值用于确定记录时间点之间的实验室值，最后记录的实验室值一直持续到患者进行TE或停止研究。

1.注册后TE

在本研究纳入的2271名患者中；106名患者（4.7%）共有142例TE，整个入组期间的发生率为每100名患者年1.36例。在研究期间报告的106例TE患者中，大多数经历了次TE（n86;81.1%），其中20例（18.9%）经历了2至5次TE（补充表3）。此外，在入组前有TE病史的456例患者中，38例（8.3%）在研究期间经历过TE;在研究期间经历过TE的患者中，有35.8%在入组前有TE病史。静脉TE比动脉TE更频繁，入组时高PV患者比低危PV患者更有可能出现TE（图1A-B）。在总共142例TE中，100例为静脉事件，最常见的是深静脉血栓形成（n=43），42例为动脉，最常见的是短暂性脑缺血发作（n=15）。在研究期间有TE病史的患者经历的53例TE中，有41例为静TE，最常见的是深静脉血栓形成（n=19），12例是动脉事件，最常见的是短暂性脑缺血发（n=5）。在研究期间接受TE的106名患者中，69.8%在入组时接受阿司匹林治疗，23.6%接受抗凝治疗。与学术中心（4.7%，n=18）相比，社区（4.9%，n=81）的TE患者比例相似；在未指定类型治疗中心登记236 名患者中，有7名患有TE。

2.血细胞计数与TE之间的关联

对入组后期间发生的首次TE进行时间依赖性协变量分析。每种血细胞计数类型（血细胞比容、白细胞、血小板和中性粒细胞）使用TE前收集的最新实验室值以及年龄、性别、疾病持续时间、TE病史和治疗的协变量独立建模。TE发生与血细胞比容水平>45% vs ≤45%（P=0.0028）、白细胞计数>11 × 109/L vs ≤11 × 109/L（P <0.0001）、血小板计数>400 × 109/L vs ≤400 × 109/L（P=0.0170）和中性粒细胞绝对计数>7×109/L vs ≤7 × 109/L（P <0.0001）。还探索了白细胞计数（≥7× 109/L至<8.5 × 109/L与<7 × 109/L和≤8.5 × 109/L至<11 ×109/L与<7 × 109/L）和血小板计数（>600 × 109/L）的替代阈值，以进一步表征上述观察到的关联的显着性，并且没有观察到血细胞计数和TE发生之间的显着关联。

3.PV风险在血细胞计数和TE之间的关联

为了确定既定PV风险类别中与TE风险相关的变量，对高风险和低风险PV患者进行了亚组分析。由于它们被纳入PV风险的定义，因此在此分析中，TE的年龄和病史都被删除为变量。在高危PV患者（n=1768）中，血细胞比容水平>45%和白细胞计数>11×109/L与TE风险增加显著相关（P<0.01）。血小板计数>400 × 109/L也与TE发生率增加显著相关（P<0.05），而男性与TE发生率降低显著相关（P<0.05）。低风险PV中TE危险因素的分析受到队列规模相对较小（n=503）和事件数量较少（n=14）的限制。这些患者的TE发生率与血细胞比容水平>45%、血小板计数>400 × 109/L、男性之间没有观察到显著相关性（P>0.05）。然而，在低危PV患者中，白细胞计数>11 × 109/L仍然与TE发生相关（P<0.05）。

4.白细胞计数升高与TE与受控血细胞比容之间的关联

45%的血细胞比容是PV中既定的治疗阈值；因此，我们研究了当血细胞比容水平维持在≤45%时，TE的发生是否仍然与白细胞计数升高相关。在2个单独的相互作用模型中评估了白细胞计数升高>11 × 109/L和>12 × 109/L与TE发生之间的关联，其中血细胞比容水平控制在≤45%（图4）。包括年龄、性别、病程、TE 病史和治疗的协变量。与白细胞计数≤12 × 109/L相比，白细胞计数>12× 109/L与TE发生率的关联显著（P=0.0300）；与白细胞计数≤11 × 109/L）相比，白细胞计数升高>11 × 109/L与TE发生率增加无显著相关（P=0.05260）

REVEAL的这项分析是迄今为止最大的PV前瞻性研究，为白细胞增多与TE风险之间的关联提供了进一步的证据。这些数据，结合ECLAP等先前前瞻性研究以及多项回顾性分析的数据，表明控制血细胞比容和白细胞计数在PV疾病管理中很重要。本研究的结果可用于改进招募PV患者的临床研究的设计。此外，它们还提供了超越PV中传统风险模型的证据，并改进了患者的风险分层和治疗指南。